Friday, December 25, 2009

Cấy mô phân sinh

Đói với loài đa thân Cấy mô phân sinh..

Thứ hai, 06/12/2004, 11:06 GMT+7

[b]Đói với loài đa thân Cấy mô phân sinh đỉnh (apical meristem) và mồ phân sinh bên (lateral meristem) của Cymbidium trên cùng một lúc hai môi trường lỏng và dặc (Yonco sagaw, t. Shoji và t. Shoji 1968) :[/b] [b]Vật liệu nuôi cấy :[/b] Những chồi trên các hướng lead) dài 8 - 10cm hoặc chồi mới mọc từ giả hành già được đâm trong dớn ẩm đều dùng được. Từ chồi mới ta tách ra 3 lá, sẽ thấy được các chồi nách, nhúng chồi vào dung dịch clorox 10% (hipoclorit na tri) để khử trùng, cất chồi nách (axillary buds) thành mô cấy với thể tích 2 - 3mm2, nhúng trong dung dịch clorox 1% trong 3 phút để khử trùng một lần nữa. Tiếp tục tách 5 - 7 lá nữa, chừa lại một lá cuối cùng nhúng mầm vào clorox 5% từ 5 - 8 phút. Cắt chồi ngọn (apical bud) thành mô cấy với thể tích 2 - 3mm bằng 4 đường dọc và 1 đường ngang, cuối cùng nhúng vào dung dịch clorox 1% trong 3 phút. [b]+ Điều kiện nuôi cấy:[/b] - Có thể dùng 1 trong 2 môi trường Vacin và Went, hoặc Knudson C. - ph=5,2. - ánh sáng : 1.200lm/m2. - Quang kỳ : 14 giờ. - Nhiệt độ : 22 – 25 0C. Máy lắc : 100 vòng/phút. + Quan sát và kết quá : Sau thời gian từ 4 đến 6 tuân, sẽ xuất hiện các plbs với đường kính 2 - 3mm, cắt làm 3 - 4 mảnh, cấy chuyền vào môi trường mới, các động tác này cách nhau 10 ngày. Muốn tạo các cây con để nguyên plbs. Nên sử dụng môi trường lỏng cho việc nuôi cấy, mô cấy có thể to tới thể tích 5mm2. mô cấy được nuôi trong thời gian từ 3 - 4 tuần trong môi trường lỏng, sau đó chuyển sang môi trường đặc khoảng 2 tuần thì xuất hiện plbs. [b]+ Kết luận :[/b] Không có sự khác biệt về thời gian hình thành plbs, giữa môi trường đặc và đồng thời dùng 2 môi trường lỏng và đặc cùng lúc. - Nếu dùng môi trường lỏng, kích thước mô cấy có thể lớn đến 5mm. - Chồi ngọn và chồi bên đều có hình thành plbs.

[b]Đói với loài đa thân Cấy mô phân sinh đỉnh (apical meristem) và mồ phân sinh bên (lateral meristem) của Cymbidium trên cùng một lúc hai môi trường lỏng và dặc (Yonco sagaw, t. Shoji và t. Shoji 1968) :[/b] [b]Vật liệu nuôi cấy :[/b] Những chồi trên các hướng lead) dài 8 - 10cm hoặc chồi mới mọc từ giả hành già được đâm trong dớn ẩm đều dùng được. Từ chồi mới ta tách ra 3 lá, sẽ thấy được các chồi nách, nhúng chồi vào dung dịch clorox 10% (hipoclorit na tri) để khử trùng, cất chồi nách (axillary buds) thành mô cấy với thể tích 2 - 3mm2, nhúng trong dung dịch clorox 1% trong 3 phút để khử trùng một lần nữa. Tiếp tục tách 5 - 7 lá nữa, chừa lại một lá cuối cùng nhúng mầm vào clorox 5% từ 5 - 8 phút. Cắt chồi ngọn (apical bud) thành mô cấy với thể tích 2 - 3mm bằng 4 đường dọc và 1 đường ngang, cuối cùng nhúng vào dung dịch clorox 1% trong 3 phút. [b]+ Điều kiện nuôi cấy:[/b] - Có thể dùng 1 trong 2 môi trường Vacin và Went, hoặc Knudson C. - ph=5,2. - ánh sáng : 1.200lm/m2. - Quang kỳ : 14 giờ. - Nhiệt độ : 22 – 25 0C. Máy lắc : 100 vòng/phút. + Quan sát và kết quá : Sau thời gian từ 4 đến 6 tuân, sẽ xuất hiện các plbs với đường kính 2 - 3mm, cắt làm 3 - 4 mảnh, cấy chuyền vào môi trường mới, các động tác này cách nhau 10 ngày. Muốn tạo các cây con để nguyên plbs. Nên sử dụng môi trường lỏng cho việc nuôi cấy, mô cấy có thể to tới thể tích 5mm2. mô cấy được nuôi trong thời gian từ 3 - 4 tuần trong môi trường lỏng, sau đó chuyển sang môi trường đặc khoảng 2 tuần thì xuất hiện plbs. [b]+ Kết luận :[/b] Không có sự khác biệt về thời gian hình thành plbs, giữa môi trường đặc và đồng thời dùng 2 môi trường lỏng và đặc cùng lúc. - Nếu dùng môi trường lỏng, kích thước mô cấy có thể lớn đến 5mm. - Chồi ngọn và chồi bên đều có hình thành plbs.

No comments:

Post a Comment